a) padronizar plataformas de produção de diferentes tipos de células modificadas para expressar receptores CAR, tais como células T-CAR, células NK-CAR e TIL-CAR, a fim de estabelecer a melhor condição de produção de cada uma dessas células;
b) testar os três tipos de células expressando CAR específicos para diferentes alvos expressos em câncer colorretal (dois CARs monoespecíficos e um CAR biespecífico), de modo que os melhores alvos sejam identificados;
c) determinar a construção do CAR, assim como tipo de célula expressando CAR (célula T-CAR, NK-CAR, TIL-CAR) mais eficiente para destruição das células tumorais in vitro; e d) em seguida, avaliar a eficácia e segurança dessas células CAR em modelo murino.

a) determinar a eficiência de transdução de células T, NK e TIL expressando CAR contra antígenos de colorretal por citometria de fluxo;
b) determinar e quantificar a expansão das células T-CAR, NK-CAR e TIL-CAR transduzidas in vitro;
c) determinar o fenótipo das células T-CAR, NK-CAR e TIL-CAR por meio de citometria de fluxo;
d) caracterizar efeitos citotóxicos in vitro das células T-CAR, NK-CAR e TIL-CAR contra células de linhagem de câncer colorretal e comparar a atividade antitumoral dessas células;
e) estabelecer o modelo animal de câncer colorretal; e
f) estabelecer a dose máxima tolerada e a eficácia de células T-CAR, NK-CAR e TIL-CAR utilizada no tratamento de animais com câncer colorretal.

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